小鼠MSTN shRNA设计及其活性检测

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【摘要】

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根据小鼠肌肉生长抑制素（MSTN）mRNA序列设计4对shRNA序列,通过退火连接到shRNA过表达载体pGPU6/GFP/Neo,构建相应的过表达载体pGPU6/GFP/Neo-MSTN shRNA。转染C2C12细胞后,利用

【作者】

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祁钰钰杨跃飞杨开典鞠辉明

【机构】

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扬州大学兽医学院/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

【出处】

：

扬州大学学报：农业与生命科学版

【发表日期】

：

2015年3期

【关键词】

：

小鼠肌肉生长抑制素 SHRNA 基因沉默 mice myostatin shRNA gene silencing

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（31101683）, 江苏省高校优势学科建设工程项目（2014-10）

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根据小鼠肌肉生长抑制素（MSTN）mRNA序列设计4对shRNA序列,通过退火连接到shRNA过表达载体pGPU6/GFP/Neo,构建相应的过表达载体pGPU6/GFP/Neo-MSTN shRNA。转染C2C12细胞后,利用实时荧光定量PCR（QRT-PCR）及Western blot试验对shRNA基因沉默后MSTN mRNA及蛋白的表达水平进行检测。结果表明：设计并构建的4个MSTN shRNA过表达载体,在细胞水平都能有效降低MSTN mRNA及蛋白的表达水平,其中转染pGPU6/GFP/Neo

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