纳豆激酶基因克隆及其在大肠杆菌中活性表达研究

来源 :湖北大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：liongliong586

【摘要】

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以纳豆芽孢杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增了纳豆激酶基因(natto kinase gene)中编码前肽、成熟肽的核苷酸序列(pro-NK),构建大肠杆菌表达质粒pTYB102,转化大肠杆菌ER2566.在IP

【作者】

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闫达中许芳李洁冯建成杨艳燕

【机构】

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湖北大学生命科学学院

【出处】

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湖北大学学报：自然科学版

【发表日期】

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2003年1期

【关键词】

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纳豆激酶基因克隆大肠杆菌基因表达 natto kinasegene cloningEscherichia coliexpression

【基金项目】

：

湖北省教育厅科研项目

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以纳豆芽孢杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增了纳豆激酶基因(natto kinase gene)中编码前肽、成熟肽的核苷酸序列(pro-NK),构建大肠杆菌表达质粒pTYB102,转化大肠杆菌ER2566.在IPTG诱导下,分别在 15℃(14?h)、30℃(3h)、37℃(2h)条件下培养,pTYB102均能表达出有活性的纳豆激酶.实验证实纳豆激酶基因得到活性表达需要Pro序列.SDS-PAGE表明,15℃比30℃和37℃培养表达的杂蛋白更少.薄层扫描测定表达的纳豆激酶占菌体总蛋白的30%以上.

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