【摘 要】
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在不改变氨基酸编码序列的情况下,根据大肠杆菌密码子偏爱性,设计并人工合成了适合于大肠杆菌表达的蝎神经毒素AaIT基因.将该基因插入到大肠杆菌表达载体PET32a+中,得到重组
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在不改变氨基酸编码序列的情况下,根据大肠杆菌密码子偏爱性,设计并人工合成了适合于大肠杆菌表达的蝎神经毒素AaIT基因.将该基因插入到大肠杆菌表达载体PET32a+中,得到重组质粒PET32a-AaIT,将该质粒转入带有trxB/gor双突变的大肠杆菌Origami(DE3),重组菌株经IPTG诱导后,获得可溶性表达产物,但该表达产物没有生物学活性.把此基因插入到含有AOX1启动子和α分泌信号肽序列的毕赤酵母表达载体pPIC6αA构建重组质粒pPIC6αA-AaIT,转化毕赤酵母(X-33),经甲醇诱导后,获得高水平的分泌表达(20 mg/L).表达产物喂食银纹夜蛾及甜菜夜蛾没有表现出生物活性,经注射有活性.
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