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提出一种基于多焦面图像处理的交叉纤维特征参数提取算法,可通过显微镜不同焦距下呈现出的清晰度差异进行交叉纤维和分叉纤维的区分.对不同聚焦下每幅图像的每一个像素点计算清晰度值,找出极大值所在的图层号作为其z方向坐标值,并记录清晰度极大值和对应的图层号.根据清晰度极大值结果进行纤维清晰度的增强处理,同时修正对应的图层号,用种子生长法对图层号进行关联区域填充.该算法能有效地区分交叉纤维和分叉纤维,为后续的纤维分离提供三维特征参数.