结核分枝杆菌MPT—64分泌蛋白在原核表达载体中的克隆,表达与鉴定

来源 :中国人兽共患病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bhf10116
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目的对结核分枝杆菌的一种分泌蛋白MPT-64基因进行克隆,鉴定与表达,为结核病诊断、重组疫苗应用和免疫效应检测打下基础.方法以结核杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,用PCR法对基因MPT-64进行扩增,产物与载体质粒pGEX-4T-1构建表达MPT-64的重组质粒,将此重组质粒先转化到E.coli DH5α内抽提质粒,酶切检验,再转化入表达宿主E.coli BL21(DE3)PLysS菌株内,对转化菌株以IPTG进行诱导后,破菌,离心,上清进行SDS-PAGE,通过电转移将胶中蛋白转到硝酸纤维素薄膜上后
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