通过体内、外试验比较人源化及鼠源化CD19 CAR-T细胞对Raji细胞株的不同杀伤活性。
方法收集8例拟行CD19 CAR-T治疗的淋巴瘤患者外周血，作为外周血单个核细胞(PBMC)、鼠源与人源化CD19 CAR-T细胞培养的T细胞来源。CCK-8法检测细胞增殖、LDH法检测细胞杀伤活性；BALB/c雌性裸鼠Raji荧光细胞株成瘤，活体成像技术观察裸鼠体内瘤体变化；流式细胞术检测细胞转染率及裸鼠体内CAR-T细胞比例。
结果两组CAR-T细胞转染率差异无统计学意义，其增殖活性于培养24 h人源化组细胞高于鼠源组，差异无统计学意义(P＝0.104)，48 h人源化CAR-T细胞增殖活性明显高于鼠源组(P＝0.009)。杀伤活性检测，设定不同效靶比(1∶1, 4∶1)，作用24 h两种CAR-T对靶细胞的杀伤活性差异无统计学意义(P＝0.102和P＝0.095)；48 h时不同效靶比人源化CD19 CAR-T细胞的杀伤活性高于鼠源组，差异有统计学意义(P＝0.005和P＝0.008) ，其杀伤活性均高于PBMC对照组。尾静脉注射细胞治疗Raji荷瘤裸鼠后14 d，鼠源和人源化CAR-T组裸鼠体内瘤体均缩小，对照组裸鼠瘤体增大，治疗21 d，鼠源组开始出现瘤体增大，而人源化组无明显变化。鼠源组裸鼠于25 d全部死亡，而人源化组裸鼠于31 d开始死亡。裸鼠体内CD19 CAR-T细胞检测示两组裸鼠均于输注后7 d达峰值，然人源化组细胞高于鼠源组(P4 d＝0.001，P7 d＝0.000，P14 d＝0.003)，鼠源组CAR-T细胞于21 d消失，人源化CAR-T细胞至35 d消失；生存期分析，对照组于治疗后20 d全部死亡，鼠源组裸鼠于治疗后25 d全部死亡，人源化组裸鼠于治疗后53 d全部死亡。
结论人源化与鼠源CD19 CAR-T细胞相比，其增殖活性强、杀伤活性高、体内存留时间长，提示人源化CD19 CAR-T在B细胞淋巴瘤治疗的临床疗效将优于鼠源CD19 CAR-T。