【摘 要】
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目的 克隆人趋化因子MIP-3alpha基因，表达并初步纯化MIP-3alpha融合蛋白。方法 从人扁桃体中提取总RNA，再进行RT-PCR，扩增MIP-3alpha成熟蛋白基因，并在5’和3’端分别添加NcoI和E
【机 构】
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第三军医大学西南医院综合实验研究中心
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(30170900)
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目的 克隆人趋化因子MIP-3alpha基因，表达并初步纯化MIP-3alpha融合蛋白。方法 从人扁桃体中提取总RNA，再进行RT-PCR，扩增MIP-3alpha成熟蛋白基因，并在5’和3’端分别添加NcoI和EcoRI酶切位点，通过与之对应的存在于pET32a（＋）质粒上的酶切位点重组于pET32a（＋）载体上，转化E．coli BL21trxB（DE3），筛选阳性克隆，酶切鉴定，DNA测序检测插入序列的正确性，缺失突变MIP-3 alpha序列前端多余碱基，获得MIP-3 alpha天然蛋白表达载
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