【摘 要】
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【目的】构建含有人巨细胞病毒（CMV）调控表达的单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSV-tk）与增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因真核表达质粒pCMV-TK-IRES-EGFP。【方法】设计HSV-tkcDNA的特异引物,P
【机 构】
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南方医科大学附属口腔医院∥广东省口腔医院,南方医科大学珠江医院肿瘤中心,广州医学院实验医学研究中心
【基金项目】
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广东省科技计划项目（2008B030301190）,广东省医学科研基金（A2007109）
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【目的】构建含有人巨细胞病毒（CMV）调控表达的单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSV-tk）与增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因真核表达质粒pCMV-TK-IRES-EGFP。【方法】设计HSV-tkcDNA的特异引物,PCR扩增获得HSV-tk基因序列,将PCR产物进行T载体克隆获得重组质粒pMD18T-TK,测序分析选定序列正确的克隆提取质粒,用限制性内切酶SalⅠ和BamHⅠ分别酶切pMD18T-TK和pCMV-IRES-EGFP质粒,将HSV-tk基因定向亚克隆至pCMV-IRES-EGFP载体,酶切鉴定
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