【摘 要】
：
根据GenBank中登录的T7RNA聚合酶基因参考序列,设计合成了1对特异性引物扩增对T7RNA聚合酶基因进行扩增,将测序正确的T7RNA聚合酶基因和真核表达载体pIRES2-EGFP双酶切后进行
【机 构】
：
中农威特生物科技股份有限公司,兰州 730046中国农业科学院兰州兽医研究所,兰州 730046;
论文部分内容阅读
根据GenBank中登录的T7RNA聚合酶基因参考序列,设计合成了1对特异性引物扩增对T7RNA聚合酶基因进行扩增,将测序正确的T7RNA聚合酶基因和真核表达载体pIRES2-EGFP双酶切后进行连接构建pIRES2-EGFP-T7RNA RNA质粒.再将构建正确的pIRES2-EGFP-T7RNA质粒经用脂质体法转染猪睾丸细胞,通过G418筛选和单细胞克隆化,同时构建pET-32a-RED原核表达质粒载体,用其检测T7启动子控制下的红色荧光蛋白的表达.结果表明,建立的ST/T7RNA细胞系经20次传代仍然能稳定表达T7 RNA聚合酶.结果显示,成功建立能稳定表达T7 RNA聚合酶的猪睾丸细胞系,为猪瘟病毒反向遗传操作平台奠定了基础.
其他文献
在热辐射功率为50 kW· m-2、气体体积流速为24 L· s-1的条件下，采用可控气氛锥形量热仪分别对黑龙江省4种常见针叶树（红松、樟子松、红皮云杉、兴安落叶松）的燃烧性能进行测定
以“日本青”大豆(Glycine max L.)种子为材料,研究了铬对大豆种子萌发的胁迫作用及水杨酸(Salicylic acid,SA)对铬胁迫的缓解效应。结果表明:在0～200 mg·L-1铬浓度范围内,随
将24头健康DLY仔猪按性别、体重随机分为2组,采用鼻腔喷雾法一组接种生理盐水(对照组CG),另一组含3.8×107 cfu·mL-1猪放线杆菌(APP)的稀释液(试验组TG),研究感染APP对猪血
分析了广西基层水利服务体系的现状及其存在的主要问题,并针对这些问题提出了相应的对策,对今后广西基层水利服务体系建设提出了建议.
以北京沙地107欧美杨人工林为研究对象，采用DELTA V Advantage同位素比率质谱仪测定杨树茎木质部δ（ D）、δ（18 O）稳定性同位素值，结合自动气象站（ HOBO）连续观测土壤含水量（ SWC）和降