【摘 要】
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目的尝试建立分离并获得稳定培养的新生大鼠原代肝细胞(HC)的简易方法。方法采用多步酶消化法和组织块培养贴壁法分离大鼠原代HC,经低速离心、选择性贴壁培养并纯化肝细胞。
【机 构】
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中国医科大学附属第一医院消化内科,中国医科大学附属第一医院细胞生物学教研室,西安交通大学附属第一医院涉外病房
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(编号:81570519)
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目的尝试建立分离并获得稳定培养的新生大鼠原代肝细胞(HC)的简易方法。方法采用多步酶消化法和组织块培养贴壁法分离大鼠原代HC,经低速离心、选择性贴壁培养并纯化肝细胞。结果最初获得单细胞数量约1~2×10^6个/只,经0.4%台盼蓝染色细胞瞬时活率>72%,单细胞悬液和组织块两种培养方法均在3~5d发现细胞可长满瓶底的70%~80%,经传代纯化以后细胞经糖原染色和抗CK-18免疫组化染色鉴定,发现HC纯度>95%,细胞生长状态良好,可供一般实验室使用。结论成功建立了获取原代培养HC的简
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