TFPI-2对缺氧大鼠星形胶质细胞生物学特性及机制的研究

来源 :中国免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lyuhuy
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目的:研究组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)对缺氧大鼠星形胶质细胞生物学特性的影响,探讨其对大鼠星形胶质细胞缺氧保护的机制.方法:从大鼠脑组织中分离培养星形胶质细胞,将细胞作缺氧处理,分别采用qRT-PCR和Western blot法检测星形胶质细胞中TFPI-2表达水平.在星形胶质细胞中转染TFPI-2 siRNA后,采用qRT-PCR和Western blot法检测TFPI-2基因沉默效果,MTT检测星形胶质细胞增殖,流式细胞术检测星形胶质细胞凋亡情况,qRT-PCR检测星形胶质细胞中β-连环蛋白(β-catenin)、c-myc、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)mRNA表达水平.结果:Hypoxia组星形胶质细胞中TFPI-2 mRNA水平和蛋白水平明显高于Control组星形胶质细胞,转染TFPI-2 siRNA后,si-TFPI-2组星形胶质细胞中TFPI-2 mRNA和蛋白表达水平明显低于si-control组细胞,差异有统计学意义(P<0.05).缺氧星形胶质细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,细胞中 β-catenin、c-myc、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达明显升高,与正常培养的星形胶质细胞比较,差异有统计学意义(P<0.05).对缺氧星形胶质细胞敲减TFPI-2后,细胞存活率升高,细胞凋亡率和细胞中 β-catenin、c-myc、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白水平降低,与缺氧星形胶质细胞比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论:下调TFPI-2可以促进缺氧星形胶质细胞增殖,抑制细胞凋亡,其作用机制与抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活有关.
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