【摘 要】
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目的优化CHO DG44细胞的电转染条件,提高细胞的转染效率。方法采用电转染的方法将p EGFP-1质粒转入CHO DG44细胞内,利用L9(33)正交试验设计,对质粒量、电压和电容3因素进行优
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目的优化CHO DG44细胞的电转染条件,提高细胞的转染效率。方法采用电转染的方法将p EGFP-1质粒转入CHO DG44细胞内,利用L9(33)正交试验设计,对质粒量、电压和电容3因素进行优化,流式细胞仪检测不同条件下的绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)阳性率和GFP的平均荧光强度,台盼蓝染色对细胞进行计数,了解细胞生长情况。结果 3个因素中,电压对转染效率影响最大,其次为电容,质粒浓度影响最小。质粒量8μg、电压300 V、电容900μF为最佳电转染条件。结论优化了CHO DG44细胞的电转染条件,为外源基因转染CHO DG44细胞表达重组蛋白提供了基础数据。
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