生酮饮食对癫痫大鼠海马的保护作用及机制研究

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目的探讨生酮饮食(KD)对戊四氮(PTZ)点燃大鼠海马损伤及哺乳动物雷帕霉素钯蛋白(mTOR)通路表达的作用机制。方法将55只雄性SD大鼠隔日腹腔注射PTZ制作癫痫动物模型直至完全点燃,另5只大鼠(空白对照组)腹腔注射0.9%氯化钠溶液。完全点燃后的44只大鼠随机分成4组,即正常食物(ND)+PTZ组、ND+PTZ+雷帕霉素(RAP)组、KD+PTZ组、KD+PTZ+RAP组,每组11只,均予侧脑室置管并再次给予隔日腹腔注射PTZ,共5次;其中ND+PTZ+RAP组、KD+PTZ+RAP组给药前30min侧脑室注射RAP,ND+PTZ组、KD+PTZ组予以等量人工脑脊液。观察并比较5组大鼠癫痫发作等级,海马区神经元密度,海马区p S6、S6、pAkt、Akt、pAMPK、AMPK的表达(采用Western blot法检测)。结果 KD+PTZ组大鼠癫痫发作等级明显低于ND+PTZ组(P<0.01);KD+PTZ+RAP组发作等级明显低于ND+PTZ组及ND+PTZ+RAP组(均P<0.05)。海马CA1区神经元密度:KD+PTZ组明显大于ND+PTZ组(P<0.05),KD+PTZ+RAP组大于ND+PTZ+RAP组(P<0.05),ND+PTZ+RAP组大于ND+PTZ组(P<0.05)。与空白对照组相比,ND+PTZ组p S6/S6、pAkt/Akt蛋白表达增加(均P<0.05),其余4组pAMPK/AMPK蛋白表达均增高(均P<0.05);与ND+PTZ组相比,KD+PTZ组p S6/S6、pAkt/Ak蛋白表达均降低(均P<0.05),pAMPK/AMPK蛋白表达增高(P<0.05);与ND+PTZ组相比,ND+PTZ+RAP组p S6/S6、pAkt/Akt蛋白表达均明显降低(均P<0.05);与KD+PTZ组相比,KD+PTZ+RAP组p S6/S6、pAkt/Akt蛋白表达明显降低(均P<0.05);与ND+PTZ+RAP组相比,KD+PTZ+RAP组p S6/S6蛋白表达明显下降(P<0.05),pAMPK/AMPK增高(P<0.05)。结论 KD具有抗癫痫发作、减少神经元丢失的作用,这种保护作用可能与其对m TOR通路的抑制有关,且其上游可能通过抑制Akt通路的磷酸化、激活AMPK通路的磷酸化来调节m TOR通路。
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