探讨白细胞介素(IL)25调控Ⅱ型固有淋巴细胞(type Ⅱ innate lymphoid cells,ILC2s)活化在变应性真菌性鼻窦炎(allergic fungal rhinosinusitis,AFRS)发病机制中的作用。
方法收集2016年6月至2017年6月期间,于郑州大学第一附属医院鼻科诊治的16例AFRS患者的鼻黏膜组织,并选取同期行鼻内镜脑脊液鼻漏修补术或颅底良性肿瘤切除术的12例患者的鼻黏膜组织作为对照组。首先应用流式细胞术检测两组鼻黏膜组织中的ILC2s,然后应用免疫荧光和(或)Western Blot的方法检测IL-25、IL-5和IL-13在鼻黏膜组织中的表达,最后应用真菌提取物、IL-25和糖皮质激素分别刺激体外培养的鼻黏膜上皮细胞和组织,检测IL-25对ILC2s的调控作用。以SPSS 16.0软件对数据进行统计学分析。
结果AFRS组鼻黏膜组织中ILC2s百分比为(3.85±1.52)%(
±s,下同),明显高于对照组(0.32±0.10)%,二者差异具有统计学意义(U=9.00,P<0.05)。ARFS患者鼻黏膜组织中ILC2s百分比和嗜酸粒细胞数量呈正相关(r=0.80,P<0.05)。两组患者鼻黏膜上皮组织均有IL-25、IL-5和IL-13的表达,AFRS组的表达强度明显高于对照组(0.49±0.13比0.23±0.09,0.23±0.05比0.10±0.04,0.31±0.08比0.14±0.07,t值分别为5.90、7.21、5.69,P值均<0.05)。真菌刺激体外原代培养的鼻黏膜上皮细胞后,两组患者鼻黏膜上皮细胞的IL-25蛋白表达强度均升高(AFRS组为0.67±0.19比0.25±0.12,对照组为0.62±0.17比0.27±0.16,q值分别为8.65、9.26,P值均<0.05)。以浓度为1、10和100 ng/ml的IL-25刺激鼻黏膜组织12 h后,维甲酸相关孤儿核受体α(retinoid acid-related orphan receptor α,RORα)mRNA的表达量分别为2.07±1.53、5.06±0.93、7.38±2.30,GATA结合蛋白3(GATA binding protein 3,GATA3)mRNA的表达量分别为3.58±1.29、6.14±1.55、7.64±2.28,IL-5蛋白的表达量分别为0.21±0.06、0.32±0.06、0.38±0.10,IL-13蛋白的表达量分别为0.52±0.13、0.69±0.22、0.82±0.21,均高于刺激前(1.00±0.00、1.00±0.00、0.11±0.05、0.35±0.15),差异具有统计学意义(F值分别为63.45、59.27、49.35、20.20,P值均<0.05),地塞米松可抑制四者表达的上调(F值分别为89.20、92.47、99.63、49.82,P值均<0.05)。
上皮细胞衍生的IL-25上调了ILC2s依赖的转录因子RORα和GATA3 mRNA的表达,二者与组织中IL-13和IL-5表达水平升高呈正相关,可能参与了AFRS的炎性反应,并可受糖皮质激素抑制。