【摘 要】
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目的原癌基因pokemon是转录抑制因子,高表达于多种肿瘤细胞中,但其在肿瘤发生发展中的机制仍有待阐明。文中研究pokemon在胃腺癌细胞系BGC823中的作用及机制。方法将pokemon
【机 构】
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南京大学医学院免疫与生殖生物实验室,南京大学医药生物技术国家重点实验室
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目的原癌基因pokemon是转录抑制因子,高表达于多种肿瘤细胞中,但其在肿瘤发生发展中的机制仍有待阐明。文中研究pokemon在胃腺癌细胞系BGC823中的作用及机制。方法将pokemon的编码片段构建入真核表达载体pcD-NA3.1(+)中。将具有靶向沉默pokemon的siRNA互补的DNA构建到pSilencer 3.1 H1-neo中。将构建的质粒pcDNA3.1-pokemon和pSilencer 3.1 H1-3#用脂质体2000转染BGC823细胞。用流式细胞仪检测细胞凋亡,用RT-PCR分析细胞内mRNA的变化,用Western blot检测pokemon蛋白的表达。结果成功构建了pokemon过表达/干扰载体pcDNA3.1-pokemon和pSi-lencer 3.1 H1-3#。在BGC823细胞中,过表达的pokemon可显著抑制p53,促进白细胞介素6(IL-6)转录。干扰pokemon基因的表达可使p53的转录增强。pokemon过表达可抑制BGC823的凋亡,沉默pokemon表达可促进凋亡。结论 pokemon抑制胃肿瘤细胞BGC823凋亡,p53和IL-6是pokemon下游的靶基因。
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