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为解决葡激酶存在的溶栓后再栓塞问题，利用PCR介导的定点突变技术，在野生型葡激酶（wt-SAK）N-末端的第3、4位氨基酸之间插入Arg-Gly-Asp（RGD）序列构建了葡激酶突变体MD2-SAK，另将N-末端的前3位氨基酸替换为RGD序列构建了葡激酶突变体MD4-SAK。将突变体基因分别连接表达载体pBV220，转化大肠杆菌DH5α，经过热激诱导后，突变体均以可溶性形式得到高效表达，表达蛋白占菌体总蛋白的50％以上。破菌上清液通过SP-Sepharose FF、Sephadex G-50和Q-Seph