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目的:采用超高效液相色谱法(UPLC),建立同时测定桑黄中Inoscavin A和Hypholomine B含量的方法,并进行鉴别与评价应用。方法:采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm);流动相:0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈进行梯度洗脱;检测波长:395 nm;流速:0.3 mL/min;柱温:35℃;进样体积:2.5μL。结果:Inoscavin A和Hypholomine B分别在0.0015~0.036 mg/mL和0.0075~0.118 mg/mL的范围内具有良好的线性关系,平均回收率分别为93.6%和96.5%。不同种属及产地桑黄中Inoscavin A和Hypholomine B的含量存在显著差异,其中以浙江淳安的火木针层孔菌桑黄中两者的含量最高。结论:该定量测定方法稳定、简便、快速,可应用于桑黄的种属鉴别和质量评价。