探讨山莨菪碱对心搏骤停猪复苏后心室肌缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响。
方法选择健康家猪进行实验,按随机数字表法分为假手术组、肾上腺素复苏组(对照组)与山莨菪碱复苏组(实验组,复苏时加用山莨菪碱0.4 mg/kg),每组5只。电刺激诱导心室纤颤(室颤)并维持8 min后开始心肺复苏(CPR),复苏成功后24 h留取左心室样本。经免疫荧光法观察心室肌Cx43的表达与分布,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Cx43 mRNA表达,蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测Cx43、磷酸化Cx43(p-Cx43)蛋白表达。
结果假手术组心室肌Cx43阳性表达分布均匀,多位于心肌细胞的端-端连接部位,少数位于细胞的侧-侧连接部位;对照组Cx43阳性表达较假手术组显著减少,信号强度明显下降(4.35±2.10比10.02±3.66,P<0.01);实验组Cx43阳性表达在端-端连接与侧-侧连接分布较规则,信号强度明显高于对照组(7.91±2.54比4.35±2.10,P<0.05),但明显低于假手术组(7.91±2.54比10.02±3.66,P<0.05)。对照组和实验组Cx43的mRNA与蛋白表达均较假手术组显著降低〔Cx43 mRNA(A值):0.32±0.05、 0.32±0.03比0.48±0.07;Cx43蛋白(A值):0.43±0.03、 0.50±0.07比0.65±0.04,均P<0.01〕,实验组与对照组比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。对照组p-Cx43蛋白表达明显低于假手术组(A值:0.22±0.03比0.37±0.06,P<0.01);实验组p-Cx43蛋白表达高于对照组(A值:0.29±0.07比0.22±0.03,P<0.01),而与假手术组比较差异无统计学意义(P>0.05)。假手术组、对照组、实验组p-Cx43/Cx43比值差异无统计学意义(0.57±0.09、 0.51±0.05、 0.58±0.06,均P>0.05)。
结论山莨菪碱可以纠正心搏骤停猪复苏后心室肌Cx43表达的异常,维护正常的心脏传导功能。