2-脱氧核糖-5-磷酸醛缩酶在毕赤酵母中的分泌表达

来源 :南昌大学学报：理科版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：sfyaa

【摘要】

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为实现2-脱氧核糖-5-磷酸醛缩酶基因（DERA）在毕赤酵母中分泌表达。通过PCR从E.coli BL21基因组中扩增获得DERA序列,并且与毕赤酵母分泌表达载体pPIC9K进行连接,构建得到重组质

【作者】

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刘松聂挺陆豫王水兴余勃

【机构】

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南昌大学环境与化学工程学院,南昌大学中德联合研究院

【出处】

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南昌大学学报：理科版

【发表日期】

：

2014年1期

【关键词】

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2-脱氧核糖-5-磷酸醛缩酶毕赤酵母分泌表达 2-deoxyribose-5-phosphate aldolase Pichia pastoris secr

【基金项目】

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国家自然科学基金资助项目（31301435）

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为实现2-脱氧核糖-5-磷酸醛缩酶基因（DERA）在毕赤酵母中分泌表达。通过PCR从E.coli BL21基因组中扩增获得DERA序列,并且与毕赤酵母分泌表达载体pPIC9K进行连接,构建得到重组质粒pPIC9K-DERA。重组载体经salⅠ单酶切线性化后电击转化至毕赤酵母GS115感受态细胞,用MD/MM平板筛选阳性株并在含G418的YDP培养基中筛选多拷贝插入菌株。经PCR鉴定获得一株插入pPIC9K-DERA的多拷贝嗜甲醇重组毕赤酵母菌株。用甲醇诱导该重组菌株,分泌得到具有活性的2-脱氧核糖-5-磷

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