【摘 要】
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为了研究人碱性成纤维细胞生长因子在治疗神经系统疾病中的作用 ,克隆其 c DN A序列 ,并添加 K ozak序列 ,以用于真核细胞表达。本实验提取我国自建的脑胶质瘤细胞系 BT32 5
【机 构】
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首都医科大学北京神经科学研究所!北京100054,首都医科大学北京神经科学研究所!北京100054,首都医科大学北京神经科学研究所!北京100054,首都医科大学北京神经科学研究所!北京100054,
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为了研究人碱性成纤维细胞生长因子在治疗神经系统疾病中的作用 ,克隆其 c DN A序列 ,并添加 K ozak序列 ,以用于真核细胞表达。本实验提取我国自建的脑胶质瘤细胞系 BT32 5总 RN A,设计上、下游引物用逆转录 PCR法扩增 c DNA片段 ,然后重组于 p GEM- 3zf( + )载体 ,酶切鉴定插入片段正确后测序。结果 :RT- PCR扩增到 4 73bp的带有 K ozak序列的 c DN A片段。显示 :克隆到碱性成纤维细胞生长因子 c DN A片段 ,可用于真核细胞表达
To investigate the role of human basic fibroblast growth factor in the treatment of neurological diseases, its cDN A sequence was cloned and the K ozak sequence was added for eukaryotic expression. In this experiment, we extracted the total RNA of BT32 5, a self-built human glioma cell line, and designed the upstream and downstream primers to amplify c DNA fragments by reverse transcription PCR and then recombined into p GEM-3zf (+) vector. The inserted fragment was sequenced correctly. Results: 4 73 bp of c DN A fragment with the K ozak sequence was amplified by RT-PCR. It shows that cloned basic fibroblast growth factor cDNA fragment can be used for eukaryotic expression
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