大腹圆蛛Fosmid文库的构建及MaSp基因筛选方法的探讨

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介绍了构建大腹圆蛛Fosmid基因组文库及牵引丝蛋白(MaSp)基因克隆筛选的全过程.采用改良CTAB法提取大片段基因组DNA.通过自主构建的电洗脱核酸回收装置分离回收30~40kbDNA片段,经补平磷酸化、与pCC2FOS载体连接、体外包装和转染EP1300TM-T1R,首次构建了无偏向性的大腹圆蛛Fostaid文库,其滴度为4.5×10^5cfu/mL,覆盖基因组倍数为10.以α-32P标记寡核苷酸探针对文库进行初步筛选,获得合MaSp基因的12个阳性克隆.该文库符合Fosmid文库的品质要
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