卵巢癌组织SEMA3F表达及甲基化初步研究

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目的研究神经轴突导向分子SEMA3F在不同卵巢上皮肿瘤组织的表达及其与上皮性卵巢癌各临床病理参数及预后的关系,并初步探讨SEMA3F启动子区甲基化与上皮性卵巢癌的关系。方法选取2004-12-01-2008-12-30南通大学附属医院收集的95例卵巢癌、30例交界性卵巢上皮肿瘤、30例良性卵巢上皮肿瘤和10例正常卵巢组织标本,采用免疫组织化学方法检测SEMA3F的表达。应用半定量RT-PCR法检测2013-05-01-2013-12-31南通大学附属医院收集的12例新鲜上皮性卵巢癌、10例新鲜良性卵巢上皮肿瘤、10例新鲜正常卵巢组织中SEMA3F的表达水平,并通过亚硫酸氢盐测序法(BSP)检测上皮性卵巢癌中SEMA3F启动子区的甲基化情况,用SPSS 17.0统计软件分析数据。结果免疫组化显示,SEMA3F在不同卵巢上皮肿瘤组织中的表达水平不同,在上皮性卵巢癌组织中表达下降或缺失明显,结合临床资料分析显示,SEMA3F表达与上皮性卵巢癌的临床分期(χ2=27.100,P<0.001)、组织学分级(χ2=10.673,P=0.005)及有无盆腔外腹膜转移(z=-4.447,P<0.001)有关,但与患者的年龄(z=-0.670,P=0.503)、组织分类(χ2=3.729,P=0.444)和淋巴结转移(z=-0.584,P=0.559)无关。Kaplan-Meier分析显示,SEMA3F阴性或低表达组患者5年生存率为23.5%(16/68),明显低于SEMA3F高表达组的52.6%(10/19),差异有统计学意义,χ2=7.460,P=0.006。RT-PCR结果显示,SEMA3FmRNA相对表达量在正常卵巢组织(1±0.080)、良性卵巢上皮肿瘤(0.927±0.116)和上皮性卵巢癌中(0.436±0.122)依次下降,前两者表达差异无统计学意义,t=0.533,P>0.05,但正常卵巢与上皮性卵巢癌组织中SEMA3F的表达差异有统计学意义,t=3.820,P<0.05,且良性卵巢上皮肿瘤与上皮性卵巢癌组织中SEMA3F表达差异亦有统计学意义,t=2.979,P<0.05。上皮性卵巢癌和正常卵巢组织中SEMA3F启动子区的平均甲基化率分别为23.17%和20.00%,两者之间差异无统计学意义,t=0.890,P>0.05。结论SEMA3F异常表达在上皮性卵巢癌的发生发展中起着重要作用,可为卵巢癌早期诊断、治疗及判断预后提供新的方法。而启动子区的甲基化可能并非该基因表达失活的主要调控者。
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