【摘 要】
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目的 探讨抑制Oct-4基因表达后乳腺癌细胞对化疗药物敏感性的变化.方法 构建Oct-4 RNAi表达载体；Lipofectin 2000转染干扰乳腺癌MCF-7细胞0ct-4表达；Real-time PCR和Western bl
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目的 探讨抑制Oct-4基因表达后乳腺癌细胞对化疗药物敏感性的变化.方法 构建Oct-4 RNAi表达载体；Lipofectin 2000转染干扰乳腺癌MCF-7细胞0ct-4表达；Real-time PCR和Western blot检测基因沉默效果;MTT细胞毒实验检测阿霉素对乳腺癌细胞的生长抑制作用；PI和Annexin V-FITC双染流式细胞仪检测细胞凋亡的变化.结果 构建的Oct-4 RNAi表达载体可以显著下调Oct-4 mRNA和蛋白的表达(P＜0.01),阴性对照表达载体对Oct-4基因没有影响(P ＞0.05)；0.02 μmol/L阿霉素作用MCF-7细胞后,细胞毒实验结果显示对照组(A)、阿霉素作用单独作用组(B)、阿霉素+阴性对照干扰载体组(C)、阿霉素+ Oct-4靶向干扰载体组(D)细胞的存活率分别为(100±6.6)％、(46.7±4.3)％、(43.8±4.6)％、(28.4±3.5)％,B、C两组之间差异无统计学意义(P＞0.05),但B、C两组与D组之间差异有统计学意义(P ＜0.01)；0.021μmol/L阿霉素作用MCF-7细胞48h后,A、B、C、D组细胞的凋亡率分别为(1.02±0.96)％、(18.81±4.56)％、(19.24±4.76)％、(34.31±5.14)％,B组与C组之间无显著性差异(P＞0.05),B、C两组与D组之间差异有统计学意义(P＜0.01).结论 构建的Oct-4 RNAi表达载体可以特异性的下调MCF-7细胞Oct-4的表达,干扰Oct-4的表达能显著增强乳腺癌细胞对化疗药物阿霉素的敏感性,为临床在不降低疗效的前提下减少化疗药物用量带来了新曙光,为乳癌癌等恶性肿瘤的化学增敏治疗开辟了新得途径.
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