【摘 要】
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猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,给全球养猪业造成了巨大的经济损失.为研发新型PCV2疫苗,采用反向遗传操作技术,以耐热低毒的新城疫病
【机 构】
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湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,湖北武汉430064;农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室,湖北武汉430064;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,湖北武汉430064;武汉大学生命科学学院,湖北武汉
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猪圆环病毒2型(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,给全球养猪业造成了巨大的经济损失.为研发新型PCV2疫苗,采用反向遗传操作技术,以耐热低毒的新城疫病毒TS09-C株为载体,将PCV2主要免疫原蛋白Cap以单独编码框的方式插入至TS09-C株的基因P和M之间,为增强Cap蛋白在载体内的高效表达及细胞外分泌,将Cap基因的核定位信号序列替换为组织纤溶酶原激活物信号肽序列(tPAs).通过病毒拯救获得了重组新城疫病毒rTS-tPAs-Cap/N.Western blot和间接免疫荧光试验证实,重组病毒可在BHK-21细胞中高效表达Cap蛋白.生物学特性试验表明重组病毒保持了亲本TS09-C株的耐热、低毒和高细胞增殖特性,重组病毒免疫小鼠后可诱导机体产生较高的PCV2抗体水平.本研究为研发耐热、安全、免疫性好的PCV2疫苗奠定了良好的工作基础.
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