【摘 要】
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目的：本研究选择细胞色素P450酶（cytochrome P450,CYP）2B6介导p,p’-滴滴涕（dichloro-diphenyl-trichloroethane,DDT）生物转化过程进行研究，为该类持久性有机污染物的风险评估和防治提供依据。方法：建立气相色谱/质谱联用仪（GCMS/MS）的检测方法以检测生物样本中的p,p’-DDT；利用重组酶CYP2B6构建体外代谢模型，采用米式方程计算
【机 构】
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南京医科大学生殖医学国家重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金（91743205,81903353,81803198）；
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目的：本研究选择细胞色素P450酶（cytochrome P450,CYP）2B6介导p,p’-滴滴涕（dichloro-diphenyl-trichloroethane,DDT）生物转化过程进行研究，为该类持久性有机污染物的风险评估和防治提供依据。方法：建立气相色谱/质谱联用仪（GCMS/MS）的检测方法以检测生物样本中的p,p’-DDT；利用重组酶CYP2B6构建体外代谢模型，采用米式方程计算代谢动力学参数；采用抑制剂8-MOP验证CYP2B6对p,p’-DDT的代谢能力；构建SD大鼠体内代谢模型（大鼠CYP2B1是人CYP2B6的同源酶），尾静脉注射p,p’-DDT和CYP2B6的特异性抑制剂KR-Ⅱ，收集血清（0、5、10、20、30 min）以及肝脏微粒体，比较对照组以及抑制剂组大鼠肝脏中CYP2B1活性以及肝脏和血清中p,p’-DDT原形及代谢产物p,p’-DDE、p,p’-DDD水平的变化。结果：成功建立了多种DDT及代谢产物的GC-MS/MS检测方法。体外代谢证实CYP2B6可代谢p,p’-DDT产生以p,p’-DDE为主的代谢产物，动力学参数Km为15.12μmol/L，每纳摩尔P450酶的Vmax为12.8nmol/min；抑制剂8-MOP可显著抑制CYP2B6活性，代谢产物p,p’-DDE的含量显著下降。CYP2B1表达被抑制后，大鼠肝脏中CYP2B1的酶活性显著下降，肝脏和血清中的代谢产物p,p’-DDE和p,p’-DDD含量也明显降低。结论：CYP2B6可以代谢p,p’-DDT生成以p,p’-DDE为主的代谢产物，是DDT的主要优势代谢酶。考虑到人群中CYP2B6的表达和活性存在差异，本研究可为DDT暴露危害的易感人群筛选及风险评估的优化提供依据。
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