【摘 要】
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目的：利用生物信息学筛选出Graves病（GD）患者外周血B细胞中差异表达的miRNA，构建miRNA-mRNA调控网络，为GD治疗提供新靶点。方法：采用微阵列技术检测初发GD患者和健康受试者外周血CD19+B细胞中miRNA和mRNA表达谱。利用TargetScan和miRBase数据库对差异miRNA的靶基因进行预测，与差异mRNA取交集，筛选出目的靶基因。构建miRNA-mRNA差异表达网络
【机 构】
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复旦大学附属上海市第五人民医院内分泌科
【基金项目】
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上海市自然科学基金项目（18ZR1429900,22ZR1448700）； 上海市医学重点专科建设计划项目（ZK2019B15）；
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目的：利用生物信息学筛选出Graves病（GD）患者外周血B细胞中差异表达的miRNA，构建miRNA-mRNA调控网络，为GD治疗提供新靶点。方法：采用微阵列技术检测初发GD患者和健康受试者外周血CD19+B细胞中miRNA和mRNA表达谱。利用TargetScan和miRBase数据库对差异miRNA的靶基因进行预测，与差异mRNA取交集，筛选出目的靶基因。构建miRNA-mRNA差异表达网络，对其进行GO注释分析，筛选出与B细胞增殖相关的mRNA并采用荧光定量PCR（qRTPCR）以及流式细胞术（FACS）等手段进行验证。结果：GD患者外周血CD19+B细胞中有119个差异表达miRNA和572个差异表达mRNA，并筛选到159个潜在靶基因。通过构建miRNA-mRNA差异表达网络以及GO注释分析等手段，证实与B细胞增殖相关的CD79B在GD患者外周血CD19+B细胞中表达升高。qRT-PCR和FACS验证得出GD患者外周血CD19+B细胞中CD79B mRNA和蛋白水平均显著上调（P＜0.01）。对调控CD79B的miRNA富集并进行qRF-PCR验证，结果显示GD患者外周血CD19+B细胞中hsa-miR-146b-5p表达显著下调（P＜0.001）。利用TargetScan数据库预测发现CD79B mRNA的3’端非编码区存在潜在的hsa-miR-146b-5p结合位点。结论：GD患者外周血B细胞中hsa-miR-146b-5p的下调可能促进CD79B上调，引起B细胞活化与增殖。CD79B有望成为GD新的生物标志物和治疗的潜在靶点。
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