分析血小板源性生长因子受体(PDGFR)-β信号在神经干细胞(NSCs)自我更新过程中的作用。
方法分离与培养生后第1、28天(P1、P28)PDGFR-β基因敲除小鼠(PDGFR-β–/–)神经源性区域NSCs，培养第2代神经球，计算其数量及直径；利用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)参入法和末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位末端标记(TUNEL)法评价其干细胞活性；利用PCR Array法分析其神经新生相关基因的调节；通过添加外源性脑源性神经营养因子(BDNF)分析其在NSCs自我更新过程中的辅助作用。
结果PDGFR-β–/– NSCs的干细胞活性明显低于鼠龄相同的对照组[BrdU(%) P1：73.3±2.7比88.7±3.6，t＝2.773，P<0.05；P28：28.6±9.6比68.2±4.5，t＝6.302，P<0.05。 TUNEL(%) P1：14.5±2.1比9.3±1.3，t＝7.222，P<0.05。第2代神经球的形成数目(只/孔)P1：25.9±1.3比117.6±3.6，t＝4.236，P<0.01；P28：13.8± 0.7比19.8±0.6，t＝2.116，P<0.01。直径(μm) P1：67.7±1.9比69.1±2.0，t＝3.211，P<0.01；P28：33.4±0.8比37.8±0.8，t＝2.354，P<0.01]。同一基因型细胞中，P28 NSCs的干细胞活性明显低于P1细胞。PCR Array显示PDGFR-β–/– NSCs中，BDNF和成纤维细胞生长因子-2的表达量明显降低(–2.04±0.25，t＝2.653，P<0.05；–3.24±0.37，t＝1.324，P<0.05)，而Noggin的表达量明显增高(2.31±0.37，t＝2.749，P<0.05)。添加BDNF可部分促进PDGFR-β–/– NSCs活性。
结论PDGFR-β信号系统可能参与NSCs的自我更新及增殖过程，且BDNF可能参与其中。