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人小肠三叶因子缺失半胱氨酸57突变体的构建及其生物活性

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：mengxiangpiaoxue

【摘 要】

：

用PCR方法构建了一个不能形成二聚体的C端缺失半胱氨酸57的hITF突变体.将其克隆到大肠杆菌表达载体pGEX-4T-1中,ITPG诱导表达,融合蛋白经Glutathione-Sepharose4B亲和层析,凝

【作 者】

：

口如琴 王蔚 李令媛 茹炳根 

【机 构】

：

北京大学生命科学学院生物化学与分子生物学系,蛋白质工程国家重点实验室,北京,100871

【出 处】

：

中国生物化学与分子生物学报

【发表日期】

：

2000年5期

【关键词】

：

小肠三叶因子 突变体 生物活性 

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用PCR方法构建了一个不能形成二聚体的C端缺失半胱氨酸57的hITF突变体.将其克隆到大肠杆菌表达载体pGEX-4T-1中,ITPG诱导表达,融合蛋白经Glutathione-Sepharose4B亲和层析,凝血酶酶切和SephacrylS100纯化,得到突变体蛋白.SDS-PAGE,氨基酸组成,飞行质谱,N端氨基酸序列测定结果与期望值一致.研究表明突变体的生物学活性有所降低.对胃蛋白酶作用的稳定性降低.

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