【摘 要】
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目的:探讨紫外线抵抗相关基因(UVRAG)对白血病细胞K562线粒体自噬的影响。方法:用不同浓度线粒体自噬诱导剂羰基氰化物间氯苯腙(CCCP)诱导K562细胞6、12和24 h,利用CCK-8法检测细胞活力;将K562细胞分为NC、UVRAG-siRNA、UVRAG-siRNA+CCCP和CCCP共4组,采用Western blot检测UVRAG蛋白质表达情况;流式细胞学技术检测活性氧、线粒体结构
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目的:探讨紫外线抵抗相关基因(UVRAG)对白血病细胞K562线粒体自噬的影响。方法:用不同浓度线粒体自噬诱导剂羰基氰化物间氯苯腙(CCCP)诱导K562细胞6、12和24 h,利用CCK-8法检测细胞活力;将K562细胞分为NC、UVRAG-siRNA、UVRAG-siRNA+CCCP和CCCP共4组,采用Western blot检测UVRAG蛋白质表达情况;流式细胞学技术检测活性氧、线粒体结构完整性的变化情况;Western blot检测自噬相关蛋白P62、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达情况。结果:与NC组相比,UVRAG-siRNA转染组UVRAG蛋白表达显著下降(P<0.01);与CCCP组相比,U VRAG-siRNA+CCCP组活性氧减少(P<0.05),线粒体结构破坏减少(P<0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达下降(P<0.01),P62蛋白表达上升(P<0.05);与NC组相比,UVRAG-siRNA组P62蛋白、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白的表达,活性氧及线粒体结构完整性差异不显著(P>0.05)。结论:CCCP作用下,沉默UVRAG能抑制K562细胞的线粒体自噬。
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