CD真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达

来源 :现代生物医学进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户：dongchangnie

【摘要】

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目的：构建含自杀基因胞嘧啶脱氨酶（CD）的真核表达载体pcDNA3．1／HA—myc-His（-）Z—CD，并进行哺乳动物细胞HEK293转染研究。方法：以本实验室保存的含CD基因全长的质粒为模版，用PcR方法扩

【作者】

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张巨峰韦芳李惠明黄陈于慧裘玮黄倩

【机构】

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上海交通大学附属第一人民医院中心实验室,上海交通大学附属第一人民医院普外科

【出处】

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现代生物医学进展

【发表日期】

：

2006年10期

【关键词】

：

自杀基因 CD基因载体构建基因表达 Suicide gene CD gene Vector construction Gene expression

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目的：构建含自杀基因胞嘧啶脱氨酶（CD）的真核表达载体pcDNA3．1／HA—myc-His（-）Z—CD，并进行哺乳动物细胞HEK293转染研究。方法：以本实验室保存的含CD基因全长的质粒为模版，用PcR方法扩增CD基因阅读框序列，并定向克隆到带有HAtag的pcDNA3．1／HA—myc-His（-）Z载体上，使目的基因与HAtag在同一阅读框。重组体质粒经EcoRI和BamHI双酶切鉴定，并对插入的CD基因片段进行测序，将鉴定好的阳性重组质粒pcDNA3．1／HA—myc-His（-）Z—CD用脂质

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