变形链球菌UA159磷酸蔗糖变位酶基因功能丧失菌株的构建

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目的:构建变形链球菌UA159磷酸蔗糖变位酶基因(phospho—sugar mutase gene,psm)功能丧失菌株,为进一步研究变形链球菌psm功能做准备。方法:将变形链球菌UA159psm内部上、下游2段序列分别克隆至自杀质粒pFW5的2个多克隆位点(MCS—Ⅰ和MCS—Ⅱ),构建重组质粒,并经酶切和测序证实。利用同源重组(homologous recombination)原理,采用自然转化的方法,实现重组自杀质粒和变形链球菌UA159同源序列的等位交换(allelic exchange)。结果
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