【摘 要】
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目的 探讨骨髓间充质干细胞外泌体(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs-Exos)对肾癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,明确骨髓间充质干细胞外泌体对肾癌细胞脂质代谢的影响及分子机制.方法 通过透射电镜和免疫印迹对提取的骨髓间充质干细胞外泌体进行鉴定,摄取实验验证肾癌细胞对骨髓间充质干细胞外泌体的摄取情况.将肾癌细胞Renca分为对照组(常规培养+PBS)和实验组(小鼠BMSCs-Exos 20 μg/mL处理Renca细胞),采用CCK-8实验观察两组细胞的增殖
【机 构】
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400016重庆,重庆医科大学附属第一医院泌尿外科
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目的 探讨骨髓间充质干细胞外泌体(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs-Exos)对肾癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,明确骨髓间充质干细胞外泌体对肾癌细胞脂质代谢的影响及分子机制.方法 通过透射电镜和免疫印迹对提取的骨髓间充质干细胞外泌体进行鉴定,摄取实验验证肾癌细胞对骨髓间充质干细胞外泌体的摄取情况.将肾癌细胞Renca分为对照组(常规培养+PBS)和实验组(小鼠BMSCs-Exos 20 μg/mL处理Renca细胞),采用CCK-8实验观察两组细胞的增殖能力;Transwell实验观察两组细胞的侵袭和迁移能力.液相色谱质谱联用的脂质组学分析肾癌细胞脂质代谢物差异,采用Western blot和qRT-PCR检测胆固醇代谢途径关键酶的表达.结果 在骨髓间充质干细胞上清液中成功提取分离骨髓间充质干细胞外泌体,透射电镜下呈典型的“杯口状”囊泡,Western blot检测结果发现外泌体标志性蛋白CD63、CD9高表达,且摄取实验表明骨髓间充质干细胞外泌体可被肾癌细胞摄取.细胞功能实验发现,与对照组比较,骨髓间充质干细胞外泌体处理后肾癌细胞的增殖(P＜0.05)、侵袭和迁移能力(P＜0.01)均增加.液相色谱质谱联用脂质组学分析显示,外泌体处理后肾癌细胞中牛磺熊去氧胆酸明显降低(P＜0.05),胆固醇升高(P＜0.05).骨髓间充质干细胞外泌体可调控HMGCR、CYP7A1、CYP7B1表达以影响肾癌细胞胆固醇代谢,促进肾癌细胞增殖和迁移.结论 骨髓间充质干细胞外泌体可通过调控肾癌细胞内胆固醇代谢关键酶的表达,影响细胞胆固醇代谢,以调控肾癌的增殖、侵袭和迁移能力.
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