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研究人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus, HCMV)临床病毒株UL/b′区域UL148基因功能及抗HCMV治疗新策略，应用DNA性质外部引导序列(External guide sequences，EGS)在体外抑制UL148 RNA的表达。
方法应用RNA structure生物软件模拟UL148 RNA二级结构，选择二级结构相对简单的区域设计EGS，并合成EGS核苷酸序列。应用PCR方法分别扩增UL148及M1RNA基因，克隆至T7启动子下游，在T7 RNA聚合酶的作用下，体外转录UL148 RNA及M1RNA，其中UL148以32P标记并进行体外转录。混合EGS、M1RNA及UL148 RNA于切割反应液中，反应1 h后，进行尿素变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，Typhoon扫描仪观察结果。
结果根据UL148 RNA二级结构选取第58～72位碱基作为EGS结合区域，其切割位点位于57位，针对此区域设计EGS57，并在体外进行EGS57与UL148 RNA结合的二级结构的模拟，可形成M1RNA天然作用底物类似的茎环结构。在T7 RNA聚合酶的作用下，分别在体外转录M1RNA及UL148 RNA，其大小均与预期相符。经切割反应，可获得与预期切割位点相符的切割条带。
结论EGS57可切割UL148 RNA，其切割位点准确，与预期相符。该研究为进一步探讨UL148基因功能提供有效基因沉默工具。