【摘 要】
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目的 探讨飞燕草素葡萄糖苷(DPg)对缺氧复氧(H/R)引起的心肌细胞损伤的影响及其机制.方法 2018年4月至2019年10月,用H9C2细胞建立心肌细胞H/R损伤模型,用常规培养的细胞作为对照组;用终浓度为50μmol/L、100μmol/L、1000μmol/L的DPg培养液处理H9C2细胞24 h,而后进行H/R处理,分别记为H/R+50μmol/L DPg组、H/R+100μmol/L DPg组、H/R+1000μmol/L DPg组;抗微小RNA-106a(anti-miR-106a)阴性对照
【机 构】
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日照心脏病医院心血管内科,山东 日照276800
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目的 探讨飞燕草素葡萄糖苷(DPg)对缺氧复氧(H/R)引起的心肌细胞损伤的影响及其机制.方法 2018年4月至2019年10月,用H9C2细胞建立心肌细胞H/R损伤模型,用常规培养的细胞作为对照组;用终浓度为50μmol/L、100μmol/L、1000μmol/L的DPg培养液处理H9C2细胞24 h,而后进行H/R处理,分别记为H/R+50μmol/L DPg组、H/R+100μmol/L DPg组、H/R+1000μmol/L DPg组;抗微小RNA-106a(anti-miR-106a)阴性对照(anti-miR-con)、anti-miR-106a质粒转染至H9C2细胞后进行H/R处理记为H/R+anti-miR-con组,H/R+anti-miR-106a组.miR-106a阴性对照(miR-con)、miR-106a分别转染至H9C2细胞中同时用100μmol/L的DPg处理24 h,而后进行H/R处理,记为H/R+DPg+miR-con组,H/R+DPg+miR-106a组.MTT法检测细胞活性;蛋白质印迹法(Western blotting)检测活化胱天蛋白酶-3(cleaved-caspase-3)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-106a表达水平.结果 与对照组相比,H/R组心肌细胞存活率显著降低,细胞凋亡率显著升高[(18.35±1.83)％比(7.05±0.71)％],cleaved-caspase-3表达水平显著升高,miR-106a表达水平显著升高[(3.56±0.36)比(1.00±0.11)](P<0.05);DPg处理的心肌细胞存活率显著升高;且100μmol/LDPg组于H/R组,细胞凋亡率显著降低[(10.25±1.03)％比(18.35±1.83)％],cleaved-caspase-3表达水平显著降低,miR-106a表达水平显著降低[(1.53±0.15)比(3.56±0.36)](P<0.05).miR-106a低表达抑制H/R引起的心肌细胞凋亡;高表达miR-106a逆转了DPg对H9C2细胞增殖促进和凋亡抑制的作用.结论 DPg可促进细胞增殖、抑制细胞凋亡,保护H/R引起的心肌细胞损伤;其机制可能与miR-106a有关.
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