苹果脂氧合酶基因MdLOX1α的同源克隆与功能验证

来源 :植物遗传资源学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:num184015922
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脂氧合酶是脂肪酸代谢途径中的关键酶,在植物生长发育、响应环境胁迫、合成香气物质等方面起着重要作用.本试验以紫红3号叶片诱导的红色愈伤组织为试材,对MdLOX1α基因及其部分启动子序列进行扩增.测序发现MdLOX1α的开放阅读框为2592 bp,编码863个氨基酸,预测其蛋白分子量为97.69kD,等电点为5.14.MdLOX1α定位于苹果基因组的第9号染色体,由8个外显子与7个内含子构成.氨基酸序列进化树分析表明,MdLOX1α与Pb9S-LOX5在同一进化枝.此外,克隆获得MdLOX1α启动子序列1058 bp,启动子元件预测表明该启动子包括响应多种胁迫的顺式作用元件.亚细胞定位发现,MdLOX1α在细胞膜与细胞核上均有定位.组织差异分析表明,MdLOX1α基因在果皮中的表达量最高,在花和果肉中次之;同时随着果实成熟MdLOX1α基因的表达量上调并且短时间光照能够诱导MdLOX1α基因表达,低温(16℃)以及不同浓度的外源ABA处理后,MdLOX1α基因的表达量均明显降低.过表达MdLOX1α验证发现较于对照组,实验组香气各成分有不同程度增加,说明MdLOX1α与香气物质的合成有关.
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