EB病毒融合蛋白Zta-P54在大肠杆菌中的表达、纯化及鉴定

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【摘要】

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为获得能用于检测试剂盒的高纯度具有活性的EB病毒融合蛋白，以pGEX5T-BZLF1-BMRF1质粒为模板进行PCR扩增得到BZLF1-BMRF1融合基因，将其插入pET32a中，构建表达质粒pET32a/BZLF1-B

【作者】

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王云龙张春艳李玉林程蕾王继创邓黎黎米海白晓静

【机构】

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郑州大学生物工程系,郑州职业技术学院,河南省生物工程技术研究中心

【出处】

：

生物技术通报

【发表日期】

：

2014年7期

【关键词】

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EB病毒 Zta-P54融合蛋白原核表达蛋白纯化 EB virus Zta-P54 fusion protein Prokaryotic expressio

【基金项目】

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河南科技攻关资助项目（132201310001）

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为获得能用于检测试剂盒的高纯度具有活性的EB病毒融合蛋白，以pGEX5T-BZLF1-BMRF1质粒为模板进行PCR扩增得到BZLF1-BMRF1融合基因，将其插入pET32a中，构建表达质粒pET32a/BZLF1-BMRF1。将该质粒转入大肠杆菌培养，经IPTG诱导获得Zta-P54融合蛋白。用DEAE-Sepharose CL-6B和Ni-NTA亲和层析纯化，并通过SDS-PAGE和Western blot对Zta-P54融合蛋白进行鉴定。双酶切鉴定和测序结果显示成功构建pET32a/BZLF1-B

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