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建立了气相色谱-质谱联用（GC-MS）测定紫花苜蓿中硒蛋氨酸含量的方法。将紫花苜蓿中提取的叶蛋白样品在6mol／L HCl溶液中，超声处理20min。离心分离后，以丁醇及三氟乙酸酐为衍生化试剂对硒蛋氨酸进行衍生化，采用选择离子监测模式对衍生物进行CA3-MS测定。硒蛋氨酸的回收率为97．6％～105．2％，相对标准偏差为1．7％～3．6％，检出限为0．3mg／L。该法样品前处理简单，测定快速，结果准确，灵敏度高，可用于植物样品中硒蛋氨酸含量的测定。