【摘 要】
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本文以南美白对虾的主要过敏原为纯化对象,选用2种商业磁珠构建免疫磁珠,利用免疫磁分离技术纯化过敏原,采用SDS-PAGE、Western blot、蛋白定量对纯化产物进行鉴定,探讨了不
【机 构】
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上海海洋大学食品学院,上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心,农业部水产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室,农业部冷库及制冷设备质量监督检验测试中心,国家淡水水产品加工技术研发分中心,上海冷链装备性能与节
【基金项目】
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上海市农委科技兴农重点攻关项目(沪农科攻字(2016)第4-4号);上海市科委地方院校能力建设项目(15320502100);上海市科委工程中心能力提升项目(16DZ2280300)
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本文以南美白对虾的主要过敏原为纯化对象,选用2种商业磁珠构建免疫磁珠,利用免疫磁分离技术纯化过敏原,采用SDS-PAGE、Western blot、蛋白定量对纯化产物进行鉴定,探讨了不同免疫磁珠对过敏原的纯化效果。结果表明,磁珠A的抗体偶联量明显高于磁珠B。此外,免疫磁珠A对抗原的结合率和洗脱率分别为免疫磁珠B的1.5、1.8倍;免疫磁珠A对过敏原捕获率为47.9%,而免疫磁珠B仅为17.6%。对比两种磁珠的理化及其结构特点,发现粒径大、分散性差的磁珠在偶联过程会发生聚集,降低抗体偶联效率,从而影响纯化效果。结果显示,分散性好、抗体偶联率高的磁珠更适宜蛋白质的分离纯化。本研究为以后过敏原的纯化提供了一定的理论基础与实验依据。
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