PCR法筛选日本血吸虫cDNA文库中磷酸丙糖转移酶基因

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目的:用PCR法自日本血吸虫童虫cDNA文库到丙糖转移酶(TPM)基因,为进一步亚克隆和表达奠定基础。方法:根据GeneBank中日本血吸虫TPM基因开放阅读框设计合成一对引的,应用PCR测定cDNA文库中该基因的频率。根据测得的频率,将适量的噬功体接种于96孔细胞培养板上进行细菌培养扩增。再利用PCR是性克民在位置,经过选择性扩增,筛选出阳性克隆,并环化成质粒,经测序验证后构建pGEM-T/TPM克隆载体。结果:经过3轮筛选,所得阳性克隆经过测序,用Genebank BLAST进行序列比较,证实为日本血
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