【摘 要】
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目的 :了解新生SD大鼠成肌细胞在体外培养条件下的生物学特性。方法 :新生 3d内SD大鼠幼崽 ,切取骨骼肌标本。应用Blau法经胰蛋白酶与胶原酶多步消化、分离成肌细胞。差速贴
【机 构】
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四川大学华西口腔医院口腔颌面外科,四川大学华西口腔医院口腔颌面外科,四川大学华西口腔医院口腔颌面外科,四川大学华西口腔医院口腔颌面外科,贵州遵义医学院口腔医院口腔颌面外科 610041; 遵
【基金项目】
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贵州省自然科学基金资助项目黔计字 (2 0 0 0 ) 30 90
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目的 :了解新生SD大鼠成肌细胞在体外培养条件下的生物学特性。方法 :新生 3d内SD大鼠幼崽 ,切取骨骼肌标本。应用Blau法经胰蛋白酶与胶原酶多步消化、分离成肌细胞。差速贴壁法纯化后 ,在 φ =2 0 %的胎牛血清生长培养基中培养 ,绘制生长曲线评价其增殖情况 ,φ =5 %的胎牛血清融合培养基培养 ,计算成肌细胞融合率评价其分化能力。通过光镜、免疫组织化学方法鉴定所得细胞。结果 :培养后成肌细胞免疫组织化学染色强阳性 ,能融合形成肌小管 ,证明为骨骼肌成肌细胞。在生长培养基中原代细胞倍增时间为 5d ,在融合培养基中肌小管融合率较高。结论 :多步酶消化法与差速贴壁法能获得足量、纯净的成肌细胞 ,所得细胞增殖力强 ,能表达骨骼肌特异收缩蛋白 ,融合培养基能促进其体外分化。
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