含CSFV E2基因A／D区原核表达载体的构建表达及其抗原性研究

来源 :中国生物工程杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：hemir

【摘要】

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应用RT-PCR方法扩增了编码猪瘟病毒石门株(CSFV shimen strain)囊膜糖蛋白E2全基因,然后将其克隆到pMD-18T质粒中,获得重组质粒pMD-E2.再以pMD-E2为模板,另行设计两对引物,同

【作者】

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王海震王秀花李学仁周斌陈溥言

【机构】

：

南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室

【出处】

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中国生物工程杂志

【发表日期】

：

2004年8期

【关键词】

：

猪瘟 E2基因原核表达免疫学反应血清学诊断 Classical swine fever virus (CSFV)Glycoprotein E2 geneP

【基金项目】

：

国家高技术研究发展计划(863计划)

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应用RT-PCR方法扩增了编码猪瘟病毒石门株(CSFV shimen strain)囊膜糖蛋白E2全基因,然后将其克隆到pMD-18T质粒中,获得重组质粒pMD-E2.再以pMD-E2为模板,另行设计两对引物,同时扩增其中一段适于在E.coli中表达且抗原反应性较好的基因片段(E2蛋白A/D抗原区基因序列),将扩增的两片段串联插入原核表达载体pET-32a中构建成重组质粒pET-2e.用酶切和序列分析鉴定插入目的基因的正确性.SDS-PAGE和Western-blot分析表明,经pET-2e转化、IPTG

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