【摘 要】
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目的探讨CD24分子对肝内Ly6Chi巨噬细胞的调节作用及其对胆管结扎(BDL)诱导的小鼠胆汁淤积型肝纤维化的影响。方法建立小鼠胆管结扎诱导肝纤维化模型,H&E染色观察肝组织形态学变化,天狼星红(Sirius Red)染色观察肝纤维化程度,血清学方法检测转氨酶改变,real-time PCR检测肝纤维化相关指标以及TGF-β1的mRNA表达,免疫荧光观察肝组织中α-SMA表达,流式细胞术检测肝内巨
【机 构】
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天津医科大学基础医学院免疫学系,天津市细胞和分子免疫重点实验室,天津医科大学免疫微环境与疾病省部共建教育部重点实验室 300070,山东省立医院西院,济南 250022,天津医科大学总医院空港医院检验
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目的探讨CD24分子对肝内Ly6Chi巨噬细胞的调节作用及其对胆管结扎(BDL)诱导的小鼠胆汁淤积型肝纤维化的影响。
方法建立小鼠胆管结扎诱导肝纤维化模型,H&E染色观察肝组织形态学变化,天狼星红(Sirius Red)染色观察肝纤维化程度,血清学方法检测转氨酶改变,real-time PCR检测肝纤维化相关指标以及TGF-β1的mRNA表达,免疫荧光观察肝组织中α-SMA表达,流式细胞术检测肝内巨噬细胞比例和数量变化以及TGF-β1的分泌。
结果在BDL诱导的小鼠肝纤维化模型中,CD24敲除(CD24-/-)小鼠与野生型小鼠(WT)相比,H&E结果显示肝脏炎性浸润增多,汇管区胆管增生更为严重。同时,血清学结果显示谷丙转氨酶(ALT)表达水平明显升高。Sirius Red染色结果表明CD24-/-小鼠肝纤维化程度明显大于WT小鼠,肝纤维化相关指标的mRNA表达也显著升高。流式细胞术分析发现,肝内巨噬细胞高表达CD24分子,WT小鼠造模后肝内的巨噬细胞比例和数量明显少于CD24-/-小鼠,进一步分析发现CD24-/-小鼠的肝内Ly6Chi巨噬细胞比例明显高于WT小鼠,其Ly6Clo巨噬细胞比例无明显差异。Real-time PCR结果显示,CD24-/-小鼠肝组织中TGF-β1的表达高于WT小鼠。细胞内染色后进行流式分析发现,造模后CD24-/-小鼠肝脏中的Ly6Chi巨噬细胞比WT小鼠分泌更多的TGF-β1。
结论CD24分子可能通过调节Ly6Chi巨噬细胞在肝中的比例和其TGF-β1的分泌,从而减轻了BDL诱导的肝纤维化。
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