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目的
观察聚乙二醇(PEG)/骨形态发生蛋白(BMP)–2纳米基因复合物及载基因仿生骨与骨髓间充质干细胞(BMSCs)对骨缺损修复的共同作用。
方法通过离子交联法制备PEG/BMP–2纳米基因复合物,通过溶液共混法制备聚乳酸(PLA)/聚已内酯(PCL)载基因仿生骨并接种BMSCs于仿生骨之上,应用免疫组化及免疫印迹检测BMSCs转染后BMP–2蛋白表达;酶联免疫方法检测转染后细胞培养上清中BMP–2分泌情况;实时聚合酶链反应检测转染后细胞BMP–2及骨钙素mRNA表达水平;截除新西兰大耳白兔双侧桡骨中段,植入载基因仿生骨材料,对骨缺损修复部位摄X线片、行HE染色和BMP–2免疫组织化学染色。
结果制备出PEG/BMP–2纳米颗粒及PEG–BMP–2–PLA/PCL载基因仿生骨。PEG/BMP–2纳米颗粒转染BMSCs和载基因仿生骨BMSCs内BMP–2表达量明显上调,骨钙素mRNA表达和碱性磷酸酶活性有所增加;体内实验中,PEG–BMP–2–PLA/PCL载基因仿生骨组与对照组比较BMP–2表达升高,新生骨在骨缺损区域所占面积比也明显增加。
结论PEG–BMP–2–PLA/PCL对骨缺损修复具有良好的效果。