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应用芴甲氧羰基（Fmoc）固相化学合成了海南捕鸟蛛毒素-Ⅲ，并优化了其最佳氧化复性条件。最佳的氧化复性条件为pH7．5的重蒸水溶液体系，样品质量浓度为0．1g／L，还原型谷胱甘肽和氧化型谷胱甘肽的浓度分别为1．0mmol／L和0．1mmol／L、L-Arg浓度为1．0mol／L。复性产物经质谱测定其相对分子质量为3607．68；与天然毒素等量混合后用高效液相色谱分析得到单一峰；膈神经-膈肌标本生理实验结果表明，合成的毒素具有与天然毒素相同的生物学活性，从而可确定二者在结构与功能上具有一致性。