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观察6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(PFKFB3)在前列腺癌组织中的表达及其对PC3和DU145前列腺癌细胞增殖的影响。
方法采用免疫组织化学染色(抗体浓度1∶50)方法，观察PFKFB3基因在前列腺癌组织及癌旁组织中的表达。实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR，40个循环，188 bp)、Western blot法[30 μl，10%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)]检测PFKFB3 mRNA和蛋白在前列腺癌细胞及前列腺上皮细胞中的表达。采用平板克隆形成实验(40 μmol/L H2O2)与细胞生长实验[20 μl噻唑蓝(MTT)]对比观察敲除PFKFB3基因前后前列腺癌细胞的生长。
结果PFKFB3基因在前列腺癌组织中的表达(2.42±0.16)明显高于癌旁组织(1.38±0.10)，差异有统计学意义(P＝0.031)；前列腺癌细胞中PFKFB3 mRNA和蛋白表达水平均高于前列腺上皮细胞，分别为2.0～2.6倍和2.5～4.5倍(P＝0.015)；敲除PFKFB3基因后，平板克隆形成实验结果显示细胞克隆形成率为敲除前的22%～35%(P＝0.018)，细胞生长实验结果显示前列腺癌细胞的增殖在第4天受抑制，为对照组的28%～30%(P＝0.026)。
结论PFKFB3基因在前列腺癌细胞和组织中高表达，PFKFB3基因对前列腺癌细胞的增殖有一定的促进作用。