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为了探讨虫草菌丝（mycelium of Cordyceps sinensis,MCs）改善D-半乳糖（D-galactose,D-gal）诱导的肾小管上皮细胞衰老的作用和分子机制,将体外培养的大鼠近端肾小管上皮细胞（NRK-52E）分为正常组（normal group,N）,模型组（D-gal model group,D）,低剂量MCs组（low dose of MCs,L-MCs）,中剂量MCs组（medium dose of MCs,M-MCs）,高剂量MCs组（high dose of MCs,H-MCs）,分别进行不同的干预。具体而言,N组加入1%胎牛血清（fetal bovine ser-um,FBS）1 m L;D组加入100 mmol·L-1D-gal;L-MCs组加入100 mmol·L-1D-gal+20 mg·L-1MCs;M-MCs组加入100 mmol·L-1D-gal+40 mg·L-1MCs;H-MCs组加入100mmol·L-1D-gal+80 mg·L-1MCs。在干预后的24或48 h,首先,观察D-gal对NRK-52E细胞klotho,P27,P16蛋白表达水平,β-半乳糖苷酶（senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-gal）染色以及腺苷酸活化蛋白激酶（adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK）/不协调的51类激酶1（uncoordinated 51-like kinase 1,ULK1）信号活性的影响;其次,观察MCs对NRK-52E细胞增殖活性的影响;最后,观察MCs对D-gal诱导的NRK-52E细胞klotho,P27,P16蛋白表达水平,SA-β-gal染色以及哺乳动物同族物微管相关蛋白1轻链3（microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3）和AMPK/ULK1信号活性的影响。结果表明,对于NRK-52E细胞,D-gal能引起衰老,并诱导磷酸化AMPK（phosphorylated-AMPK,p-AMPK）和磷酸化ULK1（phosphorylated-ULK1,p-ULK1）蛋白高表达,激活AMPK/ULK1信号通路;中、高剂量MCs与D-gal联合干预能明显改善klotho,P27,P16蛋白表达水平和SA-β-gal染色程度,具有抗细胞衰老的作用;此外,中、高剂量MCs与D-gal联合干预能明显改善LC3,p-AMPK,p-ULK1蛋白表达水平,抑制AMPK/ULK1信号活性,提高自噬水平。总之,对于D-gal诱导的肾小管上皮细胞衰老模型,MCs在体外有抗衰老的作用,并且,通过抑制自噬相关AMPK/ULK1信号活性而干预其衰老进程。这可能是MCs抗肾小管上皮细胞衰老的新的分子机制。