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目的 观察阻断体外培养兔关节软骨细胞膜上的K+、Cl-离子通道对其糖胺多糖(GAG)、Ⅱ型胶原基质合成代谢的影响.方法 2个月龄新西兰白兔,无菌条件下切取双膝关节软骨,酶解法分离软骨细胞,以5 ×104/孔接种于24孔板中.正常培养2 d细胞贴壁后换液,并以12个孔为1组随机分为3组,对照组:用DMEM/F12正常培养;K+离子通道阻滞组(简称4-AP组):利用含1 mmol/L 4-氨基吡啶(4-AP)的DMEM/F12培养,特异性阻断电压门控型K+离子通道;Cl-离子通道阻滞组(简称SITS组):利用含1 mmol/L4-乙酰氨基-4-异硫氰基-2,2-乙拌磷酸均二苯乙烯(SITS)的DMEM/F12培养,阻断阴离子通道,主要是Cl-离子通道.分别在换液后第3、6、9天留取各孔上清液并分为2份,1份以阿尔新蓝法检测其GAG的含量,同时另1份以酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测Ⅱ型胶原的含量(n=12).结果 4-AP组在第3天时与对照组比较GAG含量明显下降(P＜0.05),但第6天和第9天差异无统计学意义(P＞0.05),同时在第3天和第6天Ⅱ型胶原含量显著增加(P＜0.05),第9天时有下降趋势,但差异无统计学意义(4-AP组GAG含量分别为17.23±1.47、20.98±2.61、33.13±8.13;Ⅱ型胶原含量分别为0.793±0.214、0.789±0.084、0.715±0.388);SITS组在第3、6、9天与对照组比较GAG含量都显著增加(P＜0.05),同时在第3天和6天Ⅱ型胶原含量显著增加(P＜0.05),第9天仍然有增加的趋势,但差异无统计学意义(SITS组GAG含量分别为54.30±4.43、56.47±3.14、58.71±2.50;Ⅱ型胶原含量分别为0.793±0.125、0.853±0.060、0.925±0.053).结论 阻断K+、Cl-离子通道后显著促进软骨细胞GAG、Ⅱ型胶原的合成,尤其是阻断Cl-离子通道后,GAG的合成增加尤为明显.