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目的构建肿瘤细胞/糖脂类复合物联合TLR9配体的肿瘤疫苗,并探讨上述肿瘤疫苗对小鼠结肠癌的治疗效果。方法运用慢病毒转染GFP-CD1d至MC38肿瘤细胞构建CD1d-MC38细胞系,并加载α-Galcer(α-galactosylceramide ,α-GC)至上述细胞系制备CD1d-MC38/α-Galcer复合物。利用RT-PCR、流式细胞术检测MC38细胞系CD1d的表达情况以及对于α-Galcer结合效率。最后建立小鼠MC38结肠癌皮下肿瘤模型,观察肿瘤细胞/糖脂类复合物联合TLR9配体的肿瘤疫苗( CD1d-MC38/α-GC+CpG1826)对于小鼠肿瘤的治疗作用,免疫组化方法检测肿瘤组织中CD4+T和CD8+T细胞浸润情况。结果成功构建了表达CD1d分子的CD1d-MC38细胞系,CD1d阳性的CD1d-MC38细胞比例为(98.10±2.53)%;且该细胞系能有效结合α-Galcer,随着α-Galcer浓度升高和加载时间的延长,其结合效率逐渐上升;CD1d-MC38/α-GC+CpG1826肿瘤疫苗能有效延缓小鼠皮下肿瘤生长(与其余各组比较,P<0.01),延长荷瘤小鼠生存时间(与CD1d-MC38/α-GC组比较,P<0.05;与其余各组比较,P<0.01);肿瘤组织免疫组化显示,实验组肿瘤组织中有更多的CD4+T细胞和CD8+T细胞浸润,与CD1d-MC38/α-GC组比较,差异无统计学意义(P>0.05),与其余各组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论肿瘤细胞/糖脂类复合物联合TLR9配体的肿瘤疫苗能抑制小鼠肿瘤生长,延长荷瘤小鼠生存期,发挥抗肿瘤作用有赖于CD4+T细胞和CD8+T细胞。