转β-甘露聚糖酶基因大肠杆菌在猪肠道内的外泌型表达

来源 :内蒙古大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：DUOFIPAUT8E

【摘要】

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从里氏木霉Rut C-30提取总RNA，用RT-PCR方法克隆到β-甘露聚糖酶成熟肽eDNA，并将其EcoRⅠ和BamHⅠ酶切后连接到克隆载体pGEM进行测序，结果与GenBank公布的完全一致，随后将含有β-

【作者】

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王和平王龙文静高宏斌范文斌

【机构】

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内蒙古农业大学生物工程学院

【出处】

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内蒙古大学学报：自然科学版

【发表日期】

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2006年1期

【关键词】

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外分泌型表达 Β-甘露聚糖酶 RT-PCR external secretion β-Mannase RT-PCR

【基金项目】

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国家自然科学基金项目（39870558）

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从里氏木霉Rut C-30提取总RNA，用RT-PCR方法克隆到β-甘露聚糖酶成熟肽eDNA，并将其EcoRⅠ和BamHⅠ酶切后连接到克隆载体pGEM进行测序，结果与GenBank公布的完全一致，随后将含有β-甘露聚糖酶基因的重组质粒pGEM—ManⅠ经EcoRⅠ、绿豆芽核酸酶、HindⅡ酶切处理和纯化后，与含有Ω序列和T7启动子以及信号肽OmpT序列的分泌型表达载体pTOO2连接，构建成表达载体pTOO2-ManⅠ．然后利用大肠杆菌素释放基因（kil）能有效的增加细菌外膜通透性促进周质蛋白外泌的原理，再

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