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目的
建立简便HBV基因型S基因PCR-限制性片段长度多态性（RFLP）分型方法（以下简称“简便PCR-RFLP法”），并评价其临床应用价值。
方法临床诊断研究。查阅并比较GenBank中128株HBV（基因型A~D型）S基因片段（S区nt253-687），设计限制性内切酶HinfⅠ、EarⅠ、ApoⅠ鉴别A~D基因型分型方法，并评价简便PCR-RFLP法检测HBV DNA的最低检测下限、重复性；然后，用该方法检测50例慢性乙型重型肝炎患者的HBV基因型，同时用直接测序法验证简便PCR-RFLP法检测HBV基因型的一致性。
结果建立了简便PCR-RFLP法HBV基因分型的方案，通过限制性内切酶HinfⅠ一次酶切就可分出我国流行的B型、C型、D型等毒株及B/C混合型。随机抽取3份标本，不同稀释浓度下，用简便PCR-RFLP法重复检测HBV基因型，分型结果均与原血清完全一致，且最低检测下限约为7~9 IU/ml。经HinfⅠ酶一步酶切后，用简便PCR-RFLP法从50例患者标本中，检出B型23份、C型10份；经直接测序法验证，从PCR产物中检出B型23份、C型10份，2种方法检测B、C型基因结果完全一致（Kappa=1.00，P=0.001），简便PCR-RFLP法检出B/C混合型9份，优于PCR产物直接测序法（0份，χ2=18.00，P=0.001）。HinfⅠ酶一步酶切后分出的ABD型8份，进一步酶切及应用PCR产物直接测序法检测均为B型变异株。
结论建立的简便PCR-RFLP法对HBV基因分型有较高的灵敏度和重复性，且在检出混合基因型方面具有优势，更为简便。（中华检验医学杂志，2013：36：420-424）